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人嗜堿性粒細胞激活、脫顆粒、致敏檢測試劑盒
產品信息
貨號: BAS-H-Gp5.1
規格: 100份
反應性:人
抗體保存液:磷酸鹽緩沖液(PH 7.2),含0.09%疊氮鈉和0.2%(w/v)牛血清白蛋白(美國產)。
用途:流式細胞術-已驗證
試劑盒描述
人嗜堿性粒細胞激活、脫顆粒、致敏檢測試劑盒 | ||||
試劑名稱 | 貨號 | 規格 | 數量 | 同型對照 |
PE/Cy7標記的抗人CD123 | BAS-H-CD123-PE/Cy7100 | 500mL | 一支 | 鼠IgG1, κ |
FITC標記的抗人HLA-DR | BAS-H-HLA-DR-FITC100 | 500mL | 一支 | 鼠IgG2a, κ |
PerCP標記的抗人FcεRIα | BAS-H-FcεRIα-PerCP100 | 500mL | 一支 | 鼠IgG2b, κ |
APC標記的抗人CD63 | BAS-H-CD63-APC100 | 500mL | 一支 | 鼠IgG1, κ |
PE標記的抗人CD203c | BAS-H-CD203c-PE100 | 500mL | 一支 | 鼠IgG1, κ |
紅細胞裂解液(10×) | 11mL | 一瓶 | ||
磷酸鹽緩沖液(20×) | 10mL | 一瓶 | ||
雙蒸水 | 120mL | 二瓶 | ||
流式上樣管 | 102支 | 一包 | ||
說明書 | 一份 |
推薦用量:每批抗體均通過流式細胞術免疫熒光染色質量控制檢測。請查找您所購買具體產品說明中每100μl染色體積內100萬個細胞或100μl全血的推薦使用量, 五種抗體各5μl/人份。建議每次試驗測定滴度以達最佳效果。
保存:原液(不稀釋)4℃、避光保存,禁止冷凍。
實驗需要自備的儀器:流式細胞儀、離心機、加樣器等。
人嗜堿性粒細胞激活、脫顆粒、致敏狀態檢測試劑盒是五色檢測試劑盒。CD123表達陽性,HLA-DR陰性細胞能夠將外周血中的嗜堿性粒細胞與其它細胞區分開來。CD123表達于骨髓前體細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、肥大細胞、嗜堿性粒細胞、巨核細胞和某些B細胞。HLA-DR是異二聚體結構的細胞表面糖蛋白,由分子量為36KD的α鏈(重鏈)和27KD的β鏈(輕鏈)組成。HLA-DR表達于B細胞、活化的T細胞、單核/巨噬細胞、樹突狀細胞和其他非經典抗原遞呈細胞。CD203c是一種跨膜蛋白,一種多功能的胞外酶,參與水解胞外寡核苷酸、核苷磷酸鹽及NAD。CD203c在還原和非還原條件下分子量分別為130-150KD和270KD。CD203c表達于嗜堿性粒細胞及肥大細胞,高表達于活化的嗜堿性粒細胞。子宮內膜分泌腺及膠質瘤細胞也有CD203c表達。因此檢測CD203c分子表達變化,可代表肥大細胞、嗜堿性粒細胞激活狀態。高親和性IgE受體(FcεRI)在IgE介導的變態反應免疫應答中發揮關鍵作用。結構上,FcεRI是由1個α亞單位(FcεRIα),1個β亞單位和2個γ亞單位組成的四聚體復合物。FcεRIα可直接與IgE高親和性結合。FcεRIα分子量為50KD,具備Ig超家族跨膜蛋白結構,最早發現其表達于肥大細胞和嗜堿性粒細胞。目前發現多種炎癥細胞表達FcεRIα,如皮膚的郎漢巨細胞,樹突狀細胞,過敏患者單核細胞,血小板,支氣管上皮細胞,嗜酸性粒細胞增多征患者嗜酸性粒細胞,過敏性哮喘患者的中性粒細胞。致敏狀態下,肥大細胞和嗜堿性粒細胞上FcεRI分子表達增強,與IgE結合數量增加。因此檢測FcεRI分子表達變化,可代表肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞致敏狀態。CD63分子量53KD,是一種溶酶體糖蛋白,屬四分子交聯體跨膜超家族(TM4SF)成員之一。表達于肥大細胞、嗜堿性粒細胞、活化血小板、單核細胞/巨噬細胞、內皮細胞、成纖維細胞、破骨細胞和平滑肌細胞。CD63分子主要存在于溶酶體膜上,在肥大細胞、嗜堿性粒細胞脫顆粒時移行到細胞膜表面,因此檢測CD63分子表達變化,可代表肥大細胞、嗜堿性粒細胞脫顆粒狀態。
五色分析人外周血中嗜堿性粒細胞CD123、HLA-DR、CD203c、CD63、FcεRIα表達
用人嗜堿性粒細胞激活、致敏狀態檢測試劑盒(貨號:BAS-H-Gp5.1)標記人的外周血,然后用紅細胞裂解液進行紅細胞裂解和血細胞固定。在數據分析過程中,用CD123表達陽性,HLA-DR陰性細胞區分出外周血中的嗜堿性粒細胞。數據來源于BD FACSCanto?流式細胞儀。